細胞系鑒定錯誤的根源

 　　細胞系鑒定錯誤的根源
　　大部分的細胞系在學術環(huán)境中被建立，在學術環(huán)境下，組織培養(yǎng)通常被認為是一種對技能少有要求的技術，其所用到的必要設備如流動柜和孵育箱使用起來沒什么限制。在這些情況下，嘗試建立一種新的細胞系通常會導致交叉污染是不足為怪的。在送至德國的微生物和細胞培養(yǎng)收藏所的550個個白血病和淋巴瘤細胞系中，59/395（15%）被初創(chuàng)者送來的細胞系以及23/155（15%）的二級來源是錯誤的。可以推測大部分二級來源的細胞系已被交叉污染或被初創(chuàng)者錯誤鑒定。
　　有許多緣由可以引起細胞培養(yǎng)物錯誤鑒定，每一個實驗室都存在風險?；蛟S細胞錯誤鑒定zui直接的原因就是在常規(guī)操作過程中對細胞培養(yǎng)容器進行了錯誤標記。造成這種問題出現(xiàn)的原因有：實驗員的工作負荷、缺乏注意以及在細胞操作過程中的分心。
　　培養(yǎng)物的交叉污染以及隨后污染細胞的過量生長是另一個引起細胞系錯誤鑒定的常見原因。這種情況發(fā)生的幾率在以下條件會增加：試劑的共用、在再喂養(yǎng)操作時反復使用相同的試管、在沒有充分分離每一細胞類型情況下同時對多個培養(yǎng)物進行操作。當交叉污染發(fā)生時，一種細胞類型迅速生長而超過另一種，在4-5次細胞傳代后，一個純的污染細胞培養(yǎng)物將會形成。
　　在使用其它物種的滋養(yǎng)層（例如小鼠3T3細胞）來繁殖人類干細胞或原始細胞時有意地共培養(yǎng)會導致交叉污染或人類細胞系過生長。正常情況下，滋養(yǎng)層細胞處于無增殖狀態(tài)，但只要生長抑制程序不*，它就會不斷繁殖并逐步取代人類細胞。體細胞雜交雖不常見但也會發(fā)生，如人類套細胞淋巴瘤細胞系NCEB-1就攜帶了小鼠的七條染色體。
　　異種移植也會導致細胞系交叉污染和錯誤鑒定，來自異種移植的復蘇細胞會被宿主動物細胞所替代。
　　一般而言，交叉污染zui終的結果將會是少量適應細胞*且快速的替代。兩個細胞系不能持續(xù)共存于同一個培養(yǎng)環(huán)境，除非它們是共生關系，但這種情況據(jù)我們所知還未有報道。一個細胞群經(jīng)過許多次傳代后還能包含一個穩(wěn)定的混合基因組，*已知的情況是接續(xù)的體細胞雜交。
　　簡單、經(jīng)濟的質控措施能夠阻止或至少會減少細胞錯誤鑒定的發(fā)生。由于缺乏重視及未采用質控措施導致細胞錯誤鑒定現(xiàn)象極其普遍。大量質控措施的實行以及相應文件的適當調整被認為是生物制藥領域出現(xiàn)相對較低細胞錯誤鑒定報道的因素。